• <menu id="wm886"></menu>
  • <menu id="wm886"></menu>
    您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
    一鍵分享網站到:
    • 技術文章ARTICLE

      您當前的位置:首頁 > 技術文章 > ELISA實驗步驟及注意事項

      ELISA實驗步驟及注意事項

      發布時間: 2023-07-11  點擊次數: 152次

      ELISA實驗步驟及注意事項:

      1、固相載體選擇

      聚苯乙烯:具有較強的吸附蛋白質的性能,抗體或抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學活性。

      聚氯乙烯:聚氯乙烯對蛋白質的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值也略高溫物。

      良好的ELISA板應該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間、同一板各孔之間性能相近。

      2、包被

      ①板孔的選擇:ELISA配套的微孔板。

      ②抗體選擇:何針選擇支持ELISA實驗的抗體,根據推薦濃度稀釋或摸索最適濃度。

      ③包被緩沖液:pH9.6碳酸鹽緩沖液或pH7.2磷酸鹽緩沖液。

      ④包被溫度:2-8 ℃過夜包被或室溫(37℃)包被2h。

      ⑤包被濃度:包被濃度隨載體和包被物的性質可有很大的變化。一般包被濃度為10ug/ml-20ug/ml。

      3、封閉

      ①包被之后一定要立即封閉(封閉非特異性抗體)。

      ②選擇效果較好的封閉劑(細胞培養級BSA、Tween等)。

      4、加樣及孵育

      ①加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡。

      ②孵育的時間及溫度參考試劑盒說明書。如有條件,建議加樣孵育時使用shaker震蕩儀,推薦軌道直徑3mm,轉速在500±50rpm。

      ③檢測抗體、酶標物的稀釋比例、孵育溫度、孵育時間嚴格根據說明書提示。

      ④洗板對于ELISA來說,是極其關鍵的一步,保證ELISA的特異性。

      ⑤封板膜一定要一次一換,切勿二次甚至多次使用,以防交叉污染。

      5、顯色和終材暗總止

      ①使用前需檢查,底物在加入96孔板之前應為無色透明。

      ②顯色底物需現配現用,避免污染。

      ③孵育時間,說明書上為參考范圍,具體需要根據實驗條件自行摸索??蓞⒖紭饲鷿舛茸畲罂椎念伾?,變為藍色較明顯時即可。

    產品中心 Products
    在線客服 聯系方式

    服務熱線

    021-54479081
    021-54461587

    国产最好看的级SUV卡毛,亚洲国产一区二区三区亚瑟,亚洲国产一区二区a毛片,亚洲国产午夜精华液
  • <menu id="wm886"></menu>
  • <menu id="wm886"></menu>
    掃一掃訪問手機站掃一掃訪問手機站